附　录 D

（规范性附录）

室内空气中细菌总数检验方法　

D.1 适用范围

　   本方法适用于室内空气细菌总数测定。

　D.2 定义

　　撞击法(impacting method)是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流,使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上,经37℃、48h培养后,计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

D.3 仪器和设备

D.3.1 高压蒸汽灭菌器。

D.3.2 干热灭菌器。

D.3.3 恒温培养箱。

D.3.4 冰箱。

D.3.5 平皿(直径9cm)。

D.3.6 制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。

D.3.7 撞击式空气微生物采样器。

　　  采样器的基本要求:

　　　　(1)对空气中细菌捕获率达95％。

　　　　(2)操作简单,携带方便,性能稳定,便于消毒。

D.4 营养琼脂培养基

D.4.1.成分:

　　　　　　　蛋白胨　　　　20g

　　　　　　　牛肉浸膏　　　3g

　　　　　　　氯化钠　　　　5g

　　　　　　　琼脂　　　　　15～20g

　　　　　　　蒸馏水　　　　1000ml

D.4.2 制法 将上述各成分混合,加热溶解,校正pH至7.4，过滤分装，121 ℃，20min高压灭菌。营养琼脂平板的制备参照采样器使用说明。

D.5 操作步骤

D.5.1 选点要求见附录A。将采样器消毒,按仪器使用说明进行采样。一般情况下采样量为30～150L，应根据所用仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。

D.5.2 样品采完后，将带菌营养琼脂平板置36±1℃恒温箱中,培养48h，计数菌落数,并根据采样器的流量和采样时间,换算成每立方米空气中的菌落数。以cfu/m³报告结果。